陰離子層析去內毒的原理

A. 求助蛋白溶液內毒素去除的方法和原理

求助蛋白溶液內毒素去除的方法和原理
如果是大腸桿菌發酵後的蛋白溶液中內毒內素的含量非常高容,要去除需要進行多步處理,而且具體不同的蛋白處理的方法也不一樣.

我們也正在研究，具體是什麼蛋白呢？一般的蛋白如果是用親和層析純化的話，在層析過程中只要用大量的加Triton X-100的緩沖液沖洗就能將內毒素降低到葯典規定的范圍內了。

因為多粘菌素B親和層析柱存在安全隱患，我們不用。我們用一般的層析柱，像離子交換、金屬離子螯合層析等。

不好意思以前看過相關信息，但是現在我沒有相關資料，主要是多粘菌素B的脫落問題。

B. 內毒素檢測原理是什麼

內毒素檢測
是革蘭氏陰性菌細胞壁上的一種脂多糖（LipopolySaccharide,LPS）和蛋白的復合物，當細菌死亡或自溶後便會釋放出內毒素。內毒素大量進入血液就會引起發熱反應—「熱原反應」。內毒素與多種感染疾病密切相關，病情惡化往往伴隨著內毒素含量的增加，病情緩解也常伴隨著內毒素含量的減少。因此，快速檢測（1小時）血液、臟器內毒素含量可以為臨床相關疾病的診斷預後提供參考。

C. DEAE-纖維素陰離子柱層析分離多糖的原理是什麼

DEAE纖維素陰離子柱層板分離多糖的原理主要是其可吸附離子型物質，比如蛋白質、酸性多糖等，而作為大多數的中性多糖則可順利流出，從而去粗取精、達到分離的目的。當然，DEAE的細度很細，也可起到分子篩的作用，但其分離效果會和柱高、洗脫溶劑、粒徑的關系很大，效果並不很好，且在大量水沖的情況下，中性多糖基本均可洗脫下來。

D. 陰離子抑制器的工作原理

在離子色譜的抑製法分析過程中，使用的淋洗液是強電解質，在不使用抑制器的情況下，背景電導高，靈敏度差。以陰離子分析為例，陰離子抑制器的作用是將高電導的淋洗液轉變成為低電導的弱酸或水，從而提高檢測的靈敏度。比如常用的淋洗液是Na2CO3-NaHCO3混合溶液和KOH，都是強電解質，其電導比較高，而電導檢測器是一種通用性檢測器，選擇性相對較差，對進入電導池的導電物質都有電導響應，就是說淋洗液和待測離子都有電導響應，這樣在高的淋洗液背景電導下待測離子的電導信號就相對小了，見圖1。
如果要提高檢測靈敏度，就需要將淋洗液轉變為低電導的物質，抑制器就是來完成這個任務的，將其連接在柱與電導池之間，在樣品經色譜柱分離後，將淋洗液和待測離子轉變為相應的酸，比如：Na2CO3-NaHCO3轉變為碳酸；KOH轉變為水；Cl-、SO4轉變為鹽酸、硫酸。
這樣下來，淋洗液變成了弱酸，使得背景電導大幅降低。而待測離子的陽離子被轉換成了H+，H+的極限摩爾電導是350，比Na+、K+等陽離子的極限摩爾電導高。檢測器檢測的是陰陽離子的電導之和，這樣轉化成的HCl比原來樣品中的NaCl、KCl電導響應提高了。從而提高了檢測靈敏度。總結一下就是，經過陰離子抑制器後背景電導大幅下降而待測離子的響應電導上升，從而提高了檢測靈敏度。抑制器的作用見圖1。


如圖2所示，由淺藍色的虛線代表的陽離子交換膜（陽離子選擇性滲透膜，只有陽離子能夠透過），將抑制器分為三個室，分別為兩膜之間的抑制室和膜兩側的陽極再生室、陰極再生室。再生室中裝有電極，水在再生室內分別發生電化學反應：
陽極：H2O - 2e = 2H+ + 1/2 O2 ↑
陰極：2H2O + 2e = 2OH- + H2 ↑
在電場的作用下，陽極產生的H+透過陽離子交換膜進入抑制室，而抑制室淋洗液及樣品中的陽離子（如Na+）透過陽離子交換膜進入陰極室，這樣就將抑制室中的淋洗液及樣品全部轉化成為相應的酸，如淋洗液Na2CO3變為H2CO3，樣品NaCl變為HCl。

E. 請問離子色譜法的工作原理是什麼

您好，很高興為您解答！

樣品閥處於裝樣位置時，一定體積的樣品溶液被注入內樣品定量環，當樣品閥容切換到進樣位置時，淋洗液將樣品定量環中的樣品溶液（或富集與濃縮柱上的被測離子洗脫下來）代入分析柱，被側陰離子根據其在分析柱上的保留特性不同實現分離。淋洗液攜帶樣品通過抑制器時，所有陽離子被交換為氫離子，氫氧根型淋洗液轉換為水，碳酸根淋洗液轉換為碳酸，背景電導率降低；與此同時，被測陰離子被轉化為相應的酸，電導率身高。由電導檢測器檢測響應信號，數據處理系統記錄並顯示離子色譜圖。以保留的時間對被測離子定性，以峰高或峰面積對被測陰離子定量，測出相應離子含量。

此方法特別適於測定水溶液中低濃度的陰離子,例如飲用水水質分析,高純水的離子分析,礦泉水、雨水、各種廢水和電廠水的分析,紙漿和漂白液的分析,食品分析,生物體液(尿和血等)中的離子測定,以及鋼鐵工業、環境保護等方面的應用。離子色譜能測定下列類型的離子:有機陰離子、鹼金屬、鹼土金屬、重金屬、稀土離子和有機酸,以及胺和銨鹽等。

希望安徽康菲爾檢測科技有限公司的回答對您有所幫助~

F. DEAE 層析原理是什麼

給你找了以前的文章，你可以看一下。如下。。
層析技術是以離子交換纖維素或以離子交換葡聚糖凝膠為固定相，以蛋白質等樣品為移動相，分離和提純蛋白質、核酸、酶、激素、多糖等的一項技術。
在纖維素與葡聚糖分子上結合有一定的離子基團，當結合陽離子基團時，可換出陰離子，則稱為陰離子交換劑。如二乙氨乙基(Dicthylaminoethyl，DEAE)纖維素。在纖維素上結合了DEAE，含有帶正電荷的陽離子纖維素—O—C6 H14N+H，它的反離子為陰離子(如Cl-等)，可與帶負電荷的蛋白質陰離子進行交換。當結合陰離子基團時，可置換陽離子，稱為陽離子交換劑，如羧甲基(Carboxymethy， CM)纖維素。纖維素分子上帶有負電荷的陰離子(纖維素－O－CH2－COO一)，其反離子為陽離子(如Na+等),可與帶正電荷蛋白質陽離子進行交換。
溶液的pH值與蛋白質等電點相同時，靜電荷為0，當溶液pH值大於蛋白質等電點時，則羧基游離，蛋白質帶負電荷。反之，溶液的pH值小於蛋白質等電點時，則氨基電離，蛋白質帶正電荷。溶液的pH值距蛋白質等電點越遠，蛋白質的電荷越多。反之則越少。血清蛋白質均帶負電荷，但各種蛋白質帶負電荷的程度有所差異，以白蛋白為最多，依次為 球蛋白， 球蛋白和 球蛋白。
在適當的鹽濃度下，溶液的pH值高於等電點時，蛋白質被陰離子交換劑所吸附；當溶液的pH值低於等電點時，蛋白質被陽離子交換劑所吸附。由於各種蛋白質所帶的電荷不同。它們與交換劑的結合程度也不同，只要溶液pH值發生改變，就會直接影響到蛋白質與交換劑的吸附，從而可能把不同的蛋白質逐個分離開來。
交換劑對膠體離子(如蛋白質)和無機鹽離子(如NaCl)都具有交換吸附的能力，當兩者同時存在於一個層析過程中，則產生競爭性的交換吸附。當Cl一的濃度大時，蛋白質不容易被吸附，吸附後也易於被洗脫，當Cl一濃度小時，蛋白質易被吸附，吸附後也不容易被洗脫。因此，在離子交換層析中，一般採用兩種方法達到分離蛋白質的目的。一種是增加洗脫液的離子強度，一種是改變洗脫液的pH值。pH值增高時，抑制蛋白質陽離子化，隨之對陽離子交換劑的吸附力減弱。pH值降低時，抑制蛋白質陰離子化，隨之降低了蛋白質對陰離子交換劑的吸附。當使用陰離子交換劑時，增加鹽離子，則降低pH值。當使用陽離子交換劑時，增加鹽離子濃度，則升高溶液pH值。

G. 層析的基本原理

層析須在兩相系統間進行。一相是固定相，需支持物，是固體或液體。另一相為流動相，是液體或氣體。當流動相流經固定相時，被分離物質在兩相間的分配，由平衡狀態到失去平衡到又恢復平衡，即不斷經歷吸附和解吸的過程。隨著流動相不斷向前流動，被分離物質間出現向前移動的速率差異，由開始的單一區帶逐漸分離出許多區帶，這個過程叫展層。
系數K是物質在兩相中的濃度比。K值大，則在固定相中吸附牢，K值小吸附差。各物質間的K值差別大，則易被分離。不同類型層析的K值含義不同，可視為吸附平衡常數，分配常數或離子交換常數等。
研究層析現象而發展的塔板理論，與有機化學實驗中的分餾法原理有些相似。被分餾的有機溶劑在分餾柱內的填充物上形成許多熱交換層，從而把低沸點溶劑先分餾出來，達到純化的目的。在層析時用理論塔板數n來衡量層析效能。
tR為物質在層析柱上的保留時間，W為洗脫下來的物質峰形的寬度。n值愈大表示層析柱的效能愈高。如用理論塔板高度H表示，則包含了層析柱長度的因子。
式中L為層析柱的柱長。H值越大，則柱效越低。
此外影響層析分離效果的還有渦流擴散、縱向擴散和傳質阻抗等因素。因此選擇層析固定相支持物的粒度、均勻度等物理性能，流動相的層析系統和溫度等都是做好層析的關鍵。

H. 離子交換色譜的原理以及陰陽離子交換樹脂的特性

離子交換樹脂的結構：

離子交換樹脂主要由高分子骨架和活性基團兩部分組成，高分子骨架是惰性的網狀結構骨架，是不溶於酸或鹼的高分子物質，常用的離子交換樹脂是由苯乙烯和二乙烯苯聚合得到樹脂的骨架。

而活性基團不能自由移動的官能團離子和可以自由移動的可交換離子兩部分組成，可交換離子能夠決定樹脂所吸附的離子，比如可交換離子為H型陽離子交換樹脂，那麼這個樹脂能夠吸附的離子，就是H型陽離子，而官能團離子能夠決定樹脂的「酸"、「鹼"性和交換能力的強弱，比如官能團離子是強酸性離子，那麼樹脂就是強酸性離子交換樹脂。

離子交換樹脂的內部結構：

1.凝膠型樹脂是由純單體混合物經縮合或聚合而成的，結構為微孔狀，合成的工藝比較簡單，孔徑大概在1-2nm左右，凝膠型樹脂的操作容量高，產水量高，物理強度好，且再生效率高，被廣泛應用在食品飲料加工，超純水制備，飲用水過濾，硬水軟化，製糖業，制葯等領域。

2.大孔型樹脂的孔徑一般在10nm左右，在樹脂中孔徑是比較大的，所以被稱為大孔型樹脂，且孔徑不會隨著周圍的環境而變化，能夠彌補凝膠型樹脂不能在非水系統中使用的缺點，吸附能力非常強大，不易碎裂，耐氧化好，操作容量高，能夠應用在醫葯領域、除重金屬污染、葯品純化、水處理中除去碳酸硬度、冷凝水精處理等領域。

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I. 陰離子交換樹脂的原理大家了解嗎

陰離子交換樹脂的來原理：自

陰離子交換樹脂含有大量的鹼性基團，比如說羧基-COOH，陰離子交換樹脂在水中離解出OH-。具有功能團-N+（CH3）3，在氫氧形式下，-N+（CH3）3OH-中的氫氧離子可以快速的放出來，與水中的陰離子進行交換，陰離子交換樹脂可以和所有的陰離子進行交換去除。

J. 離子交換層析的原理是什麼 已解決

離子交換層析法是從復雜的混合物中，分離性質相似大分子的方法之一，依據的原理是物內質的酸鹼性容，極性，所帶陰陽離子的不同。電荷不同的物質，對管柱上的離子交換劑有不同的親和力，改變沖洗液的離子強度和pH值，物質就能依次從層析柱中分離出來。

層析開始前，功能基團與反離子穩定結合，就與反離子發生可逆交換，與層析劑結合被固定下來。因為鹽離子可以與底物競爭功能基團，鹽濃度越高樣品與層析劑結合越不緊密，易被洗脫下來。不同物質與層析劑結合程度不同，洗脫下來的時間不同，因此得以分開。

(10)陰離子層析去內毒的原理擴展閱讀

離子交換劑的選擇首重保持欲分離物質的生物活性，以及在不同pH值環境中，此物質所帶的電荷和電性強弱，陰陽離子交換劑的選擇若被分離物質帶正電荷，這些鹼性蛋白質，它們在酸性溶液中較穩定，親和力強，故採用陽離子交換劑。

在鹼性溶液中較穩定，則使用陰離子交換劑，如果欲分離的物質是兩性離子，一般考慮在它穩定的pH范圍帶有何種電荷，作為交換劑的選擇。離子交換劑的再生與保存離子交換劑可在柱上再生，若有脂溶性物質則可用非離子型去污劑洗柱後再生，也可用乙醇洗滌。