鹽析過後鹽離子怎樣去

① 鹽析法得到的蛋白質如何脫鹽

常用的是凝膠過濾層析脫鹽，利用具有網狀結構的凝膠的分子篩作用，根據被分離物質的分子大小不同來進行分離。

蛋白質溶液中鹽分子和蛋白質分子大小相差較大，鹽分子較小，會隨著層析流動相進入孔徑較小的固定相，在層析中遷移速率小，而蛋白質分子尺寸較大，不能隨流動相進入固定相，遷移速率大，首先從層析術中流出，實現脫鹽。

(1)鹽析過後鹽離子怎樣去擴展閱讀

鹽析作用的實質是高濃度的強電解質破壞蛋白質分子表面的水化膜，同時電解質離子中和了蛋白質所帶的電荷，蛋白質的穩定因素被消除，使蛋白質分子相互碰撞而凝聚沉澱。

蛋白質在水溶液中的溶解度取決於蛋白質分子表面離子周圍的水分子數目，亦即主要是由蛋白質分子外周親水基團與水形成水化膜的程度以及蛋白質分子帶有電荷的情況決定的。

蛋白質溶液中加入中性鹽後，由於中性鹽與水分子的親和力大於蛋白質，致使蛋白質分子周圍的水化層減弱乃至消失。

同時，中性鹽加入蛋白質溶液後由於離子強度發生改變，蛋白質表面的電荷大量被中和，更加導致蛋白質溶解度降低，之蛋白質分子之間聚集而沉澱。

由於各種蛋白質在不同鹽濃度中的溶解度不同，不同飽和度的鹽溶液沉澱的蛋白質不同，從而使之從其他蛋白中分離出來。簡單的說就是將硫酸銨、硫化鈉或氯化鈉等加入蛋白質溶液，使蛋白質表面電荷被中和以及水化膜被破壞，導致蛋白質在水溶液中的穩定性因素去除而沉澱。

② 鹽析後的蛋白質,有哪些方法可以將蛋白質與鹽分離

鹽析是通過改變鹽濃度來影響蛋白質的溶解度，是蛋白質的溶解度降低並析出，所以過濾就可以了。

③ 鹽析法怎麼去除雜質離子

首先，我們要明白鹽析的原理，然後再來談方法。
鹽析的原理是利用蛋白質在較高濃度鹽的溶液中，隨著鹽濃度的逐漸增加，由於蛋白質水化膜被破壞，溶解度下降而從溶液中沉澱出來。
一些公司提供的蛋白分離服務目的旨在從復雜的混合物中分離出單種類型的蛋白。蛋白質為兩性物質，一定pH下表面顯示一定的電性，由於經典斥力作用，使分子間互相排斥；同時由於蛋白質分子周圍，水分子成有序排列，在其表面上形成了水化膜，水化膜層能保護蛋白質粒子，避免其因碰撞而聚沉。因此蛋白質等生物大分子物質是以一種親水膠層形式存在於水溶液中，無外界影響時，呈分散狀態。
當向蛋白質溶液中逐漸加入中性鹽時，會產生2種現象：低鹽情況下，隨著中性鹽粒子強度的增高，蛋白質溶解度增大，稱鹽溶現象。但是在高鹽濃度時，蛋白質溶解度隨之減小，發生了鹽析作用。產生鹽析作用的一個原因是由於鹽離子與蛋白質表面具有相反電性的離子基團結合，形成離子對，因此鹽離子部分中和了蛋白質的電性，使蛋白質分子之間電排斥作用減弱而能相互靠攏、聚集起來。鹽析作用的另一個原因是由於中性鹽的親水性比蛋白質大，鹽離子在水中發生水化而使蛋白質脫去了水化膜，暴露出疏水區域，由於疏水區域的相互作用，使其沉澱。
由此可見，鹽析法的沉澱物中含有大量的鹽析劑，也會吸附部分雜質。這部分雜質可採取洗滌的方法除去。

④ 鹽析後的蛋白質有哪些方法可以將蛋白質與鹽分離，得到純度高的蛋白質

如果你對蛋白的純度要求比較低，那你就先過濾，再透析吧（透析完最好對殘余的鹽離子進行檢測一下，如果是硫酸銨就奈斯試劑）

純度要求較高，那就先透析，再過柱子吧（一般使用離子交換色譜）

⑤ 高中化學: 鹽析蛋白質怎麼溶解

鹽析
向蛋白質溶液中假如高濃度的中性鹽,以破壞蛋白質的膠體性質,使蛋白質的溶解度降低而從溶液中析出的現象,叫做鹽析.
原理:破壞了蛋白質在水中存在的兩個因素(水化層和電荷),從而使蛋白質沉澱.
中性鹽對蛋白質的溶解度有顯著影響，一般在低鹽濃度下隨著鹽濃度升高，蛋白質的溶解度增加，此稱鹽溶；

鹽溶
在蛋白質水溶液中，加入少量的中性鹽[即稀濃度]，如硫酸銨、硫酸鈉、氯化鈉等，會增加蛋白質分子表面的電荷，增強蛋白質分子與水分子的作用，從而使蛋白質在水溶液中的溶解度增大。這種現象稱為鹽溶。
稀濃度可促進蛋白質的溶，稱為鹽溶作用。同時稀鹽溶液因鹽離子與蛋白質部分結合，具有保護蛋白質不易變性的優點，因此在提取液中加入少量NaCl等中性鹽，一般以0.15摩爾/升濃度為宜。緩沖液常採用0.02-0.05M磷酸鹽和碳酸鹽等滲鹽溶液。當鹽濃度繼續升高時，蛋白質的溶解度不同程度下降並先後析出，這種現象稱鹽析.

將大量鹽加到蛋白質溶液中，高濃度的鹽離子（如硫酸銨的SO4和NH4)有很強的水化力，可奪取蛋白質分子的水化層，使之「失水」，於是蛋白質膠粒凝結並沉澱析出。鹽析時若溶液pH在蛋白質等電點則效果更好。由於各種蛋白質分子顆粒大小、親水程度不同，故鹽析所需的鹽濃度也不一樣，因此調節混合蛋白質溶液中的中性鹽濃度可使各種蛋白質分段沉澱。
影響鹽析的因素有：
（1）溫度：除對溫度敏感的蛋白質在低溫（4度）操作外，一般可在室溫中進行。一般溫度低蛋白質溶解度降低。但有的蛋白質（如血紅蛋白、肌紅蛋白、清蛋白）在較高的溫度（25度）比0度時溶解度低，更容易鹽析。
（2）pH值：大多數蛋白質在等電點時在濃鹽溶液中的溶介度最低。
（3）蛋白質濃度：蛋白質濃度高時，欲分離的蛋白質常常夾雜著其他蛋白質地一起沉澱出來（共沉現象）。因此在鹽析前血清要加等量生理鹽水稀釋，使蛋白質含量在2.5-3.0%。
蛋白質鹽析常用的中性鹽，主要有硫酸銨、硫酸鎂、硫酸鈉、氯化鈉、磷酸鈉等。 其中應用最多的硫酸銨，它的優點是溫度系數小而溶解度大（25度時飽和溶液為4.1M，即767克/升；0度時飽和溶解度為3.9M，即676克/升），在這一溶解度范圍內，許多蛋白質和酶都可以鹽析出來；另外硫酸銨分段鹽析效果也比其他鹽好，不易引起蛋白質變性。硫酸銨溶液的pH常在4.5-5.5之間，當用其他pH值進行鹽析時，需用硫酸或氨水調節。
蛋白質在用鹽析沉澱分離後，需要將蛋白質中的鹽除去，常用的辦法是透析，即把蛋白質溶液裝入透析袋內（常用的是玻璃紙），用緩沖液進行透析，並不斷的更換緩沖液，因透析所需時間較長，所以最好在低溫中進行。此外也可用葡萄糖凝膠G-25或G-50過柱的辦法除鹽，所用的時間就比較短。
變性
能使蛋白質變性的化學方法有加強酸，強鹼，重金屬鹽，尿素，乙醇，丙酮等；能使蛋白質變性的物理方法有加熱，紫外線照射，劇烈振盪等。 重金屬鹽使蛋白質變性，是因為重金屬陽離子可以和蛋白質中游離的羧基形成不溶性的鹽，在變性過程中有化學鍵的斷裂和生成，因此是一個化學變化。
強酸、強鹼使蛋白質變性，是因為強酸、強鹼可以使蛋白質中的氫鍵斷裂。也可以和游離的氨基或羧基形成鹽，在變化過程中也有化學鍵的斷裂和生成，因此，可以看作是一個化學變化。
尿素、乙醇、丙酮等，它們可以提供自己的羥基或羰基上的氫或氧去形成氫鍵，從而破壞了蛋白質中原有的氫鍵，使蛋白質變性。但氫鍵不是化學鍵，因此在變化過程中沒有化學鍵的斷裂和生成，所以是一個物理變化。 加熱、紫外線照射，劇烈振盪等物理方法使蛋白質變性，主要是破壞了蛋白質分子中的氫鍵，在變化過程中也沒有化學鍵的斷裂和生成，沒有新物質生成，因此是物理變化。否則，雞蛋煮熟後就不是蛋白質了。

⑥ 蛋白質鹽析離心後除去上層清液沉澱中是否含有鹽離子

肯定會有的。鹽析後所得的蛋白質是粗蛋白，會含有鹽析過程中殘留的鹽離子。

⑦ 分離提純蛋白質時常需去鹽,常用去鹽的方法有哪些

蛋白質沉澱的定義： 蛋白質分子凝聚從溶液中析出的現象稱為蛋白質沉澱(precipitation)，變性蛋白質一般易於沉澱，但也可不變性而使蛋白質沉澱，在一定條件下，變性的蛋白質也可不發生沉澱。 蛋白質沉澱的方法： 鹽析法 ——多用於各種蛋白質和酶的分離純化； 在蛋白質溶液中加入大量的中性鹽以破壞蛋白質的膠體穩定性而使其析出，這種方法稱為鹽析。常用的中性鹽有硫酸銨、硫酸鈉、氯化鈉等。各種蛋白質鹽析時所需的鹽濃度及pH不同，故可用於對混和蛋白質組分的分離。例如用半飽和的硫酸銨來沉澱出血清中的球蛋白，飽和硫酸銨可以使血清中的白蛋白、球蛋白都沉澱出來，鹽析沉澱的蛋白質，經透析除鹽，仍保證蛋白質的活性。調節蛋白質溶液的pH至等電點後，再用鹽析法則蛋白質沉澱的效果更好。鹽析法分為兩類，第一類叫Ks分段鹽析法，在一定PH和溫度下通過改變離子強度實現，用於早期的粗提液；第二種叫b分段鹽析法，在一定離子強度下通過改變PH和溫度來實現，用於後期進一步分離純化和結晶。影響鹽析的因素包括：蛋白質濃度、離子強度和類型、PH值、溫度等。針對溫度這一條，需要強調：在低離子強度或純水中，蛋白質溶解度在一定范圍內隨溫度增加而增加。但在高濃度下，蛋白質、酶和多肽類物質的溶解度隨溫度上升而下降。在一般情況下，蛋白質對鹽析溫度無特殊要求，可在室溫下進行，只有某些對溫度比較敏感的酶要求在0-四℃進行。 使用硫酸銨沉澱蛋白需要注意：硫酸銨中常含有少量的重金屬離子，對蛋白質巰基有敏感作用，使用前必須用H二S處理：將硫酸銨配成濃溶液，通入H二S飽和，放置過夜，用濾紙除去重金屬離子，濃縮結晶，一00℃烘乾後使用。另外，高濃度的硫酸銨溶液一般呈酸性（PH=5.0左右），使用前也需要用氨水或硫酸調節至所需PH。 有機溶劑沉澱法 ——多用於生物小分子、多糖及核酸產品的分離純化； 有機溶劑的沉澱機理是降低水的介電常數，導致具有表面水層的生物大分子脫水，相互聚集，最後析出。該法優點在於：一）分辨能力比鹽析法高，即蛋白質或其它溶劑只在一個比較窄的有機溶劑濃度下沉澱；二）沉澱不用脫鹽，過濾較為容易；三）在生化制備中應用比鹽析法廣泛。但是，在常溫下，有機溶劑沉澱蛋白質往往引起變性。例如酒精消毒滅菌就是如此。因此，操作要求在低溫下進行。有機溶劑的選擇首先是能和水混溶，使用較多的有機溶劑是乙醇、甲醇、丙酮，還有二甲基甲醯胺、二甲基亞碸、乙腈和二-甲基-二,四戊二醇等。 等電點沉澱法 ——此法單獨應用較少，多與其它方法結合使用； 兩性電解質分子上的凈電荷為零時溶解度最低，不同的兩性電解質具有不同的等電點，以此為基礎可進行分離。如工業上生產胰島素時，在粗提液中先調PH吧.0去除鹼性蛋白質，再調PH三.0去除酸性蛋白質。利用等電點除雜蛋白時必須了解制備物對酸鹼的穩定性，不然盲目使用十分危險。不少蛋白質與金屬離子結合後，等電點會發生偏移，故溶液中含有金屬離子時，必須注意調整PH值。等電點法常與鹽析法、有機溶劑沉澱法或其他沉澱方法聯合使用，以提高其沉澱能力。 重金屬鹽沉澱法 ——常用於搶救誤服重金屬鹽中毒的病人； 許多有機物質包括蛋白在內，在鹼性溶液中帶負電荷，能與金屬離子形成沉澱。根據有機物與它們之間的作用機制，可分為羧酸、胺及雜環等含氮化合物類，如銅鋅鎘；親羧酸疏含氮化合物類，如鈣鎂鉛；親硫氫基化合物類，如汞銀鉛。蛋白質-金屬離子復合物的重要性質是它們的溶解度對溶液的介電常數非常敏感，調整水溶液的介電常數（如加入有機溶劑），即可沉澱多種蛋白。沉澱的條件以pH稍大於等電點為宜。重金屬沉澱的蛋白質常是變性的，但若在低溫條件下，並控制重金屬離子濃度，也可用於分離制備不變性的蛋白質。臨床上利用蛋白質能與重金屬鹽結合的這種性質，搶救誤服重金屬鹽中毒的病人，給病人口服大量蛋白質，然後用催吐劑將結合的重金屬鹽嘔吐出來解毒

⑧ 透析後的蛋白質濃度和鹽析後相比為什麼會降低

這是兩種不同的概念。
鹽析：向某些蛋白質溶液中加入某些無機鹽溶液版後,可以使蛋白質凝聚權而從溶液中析出。
既然是析出，就意味著蛋白局部濃度增大，最終形成不溶物。離心收獲蛋白，可根據自己的需要將蛋白重新溶解，進而得到不同濃度的蛋白溶液。
透析（dialysis）：是通過小分子經過半透膜擴散到水（或緩沖液）的原理，將小分子與生物大分子分開的一種分離純化技術。蛋白置於透析袋內，在透析過程，小分子鹽類透出，同時因為鹽濃度差，透析袋外側的水滲入透析袋，所以袋內的蛋白被不斷稀釋，但最終會達到平衡。
所以，兩者的蛋白濃度出現差異。

⑨ 如何去除RNA中的鹽離子

RNA純化及獲得純化要求RNA樣品中不應存在對酶（如逆轉錄酶）有抑製作用的有機溶劑和過高濃度的金屬離子。避免其它生物大分子如蛋白質、多糖和脂類分子的污染。排除DNA分子的污染。純化方法及沉澱1、有機溶劑抽提法氯仿抽提：在使用RNA提取試劑進行RNA提取時，常使用氯仿進行抽提，以去除蔗糖、蛋白等雜質，並促進水相與有機相的分離，從而達到純化RNA的目的。沉澱：氯仿抽提RNA後，一般採用異丙醇或乙醇來沉澱水相RNA。加入0.6倍水相體積的異丙醇或與水相等體積的異丙醇，室溫沉澱20-30分鍾，高速離心，可獲得RNA沉澱。洗滌沉澱：加入無RNase的75％乙醇，將RNA沉澱振盪懸浮，使RNA沉澱中的鹽離子被充分溶解。然後再離心10-30分鍾，再次沉澱RNA。離心後，小心倒掉上清（注意不要倒出RNA沉澱），隨後快速離心1-2秒，將殘留在管壁上的乙醇收集到管底後，用小槍頭吸凈，超凈台中風干1-2分鍾（注意不要晾得太干，否則RNA沉澱不易溶解）。溶解沉澱：加入適量的RNase-freeddH2O溶解RNA沉澱。2、硅基質吸附法隨著實驗方法的改進，現已發展出一種採用吸附材料純化核酸的方法。目前較常見的有：硅基質吸附材料、陰離子交換樹脂和磁珠等。硅基質吸附材料因其具有可特異吸附核酸，使用方便、快捷，不使用有毒溶劑如苯酚、氯仿等優點，成為核酸純化的首選。Solarbio公司總RNA提取試劑盒就是採用硅基質吸附達到RNA分離純化目的。通過專一結合RNA的離心吸附柱和獨特的緩沖液系統，使樣品在高鹽條件下與硅膠膜特異結合，而蛋白、有機溶劑等雜質不能結合到膜上而被洗脫，鹽類則被含有乙醇的漂洗液洗滌，最後用RNase-freeddH2O將RNA從硅膠膜上洗脫下來。一些特殊組織的RNA提取纖維組織：心臟/骨骼肌等纖維組織提取RNA的關鍵在於徹底破碎組織。這些組織細胞密度低，單位重量的組織中RNA含量較低，建議增加起始量。此外，一定要在液氮中將組織徹底磨碎。蛋白/脂肪含量高的組織：腦或植物脂肪含量高，酚/氯仿抽提後，上清含白色絮狀物。必須用氯仿再次對上清進行抽提。核酸RNase含量高的組織：脾、胸腺等組織的核酸和RNase含量很高。在液氮中研磨，再快速勻漿，能有效滅活RNase，如加入裂解液後過於粘稠，酚/氯仿抽提不能有效分層，則加入裂解液可以解決此問題。多次酚/氯仿抽提可以去除殘留的DNA。如果加入乙醇後馬上有白色沉澱形成，表明可能有DNA污染，可以在核酸溶解後用酸性酚/氯仿再次抽提或者用DNaseI消化，去除DNA污染，植物組織和真菌組織：植物組織和真菌組織比動物組織更為復雜，一般選擇在液氮條件下對樣品進行研磨，以避免內源RNase降解RNA。如果RNA降解問題不能解決，大多數情況下是樣品中含有的雜質所致。許多植物和真菌中所含雜質如多糖、多酚等都會殘留，因為這些雜質分子與RNA有一些相似性，可與RNA同時沉澱或者吸附，因此在植物和真菌組織的提取中，需要用一些特別的步驟或者特別的試劑來去除多糖多酚等雜質的干擾和污染

⑩ 為什麼鹽析沉澱的蛋白質可以通過透析而脫鹽

因為鹽析不會是蛋白質變性失活，而透析是鹽會電離形成離子，因此鹽離子會通過半透膜出去，而蛋白質是大分子不會出去。
如此就得到目的了。