柱子下端流出液的速度是2倍柱體積每小時。層析柱的下端一般是由旋專塞的,開口大小控屬制流速啊,拿個量筒記下時間,比如5分鍾能流出多少體積,最後換算成每小時多少,比較下速度快慢,多退少補。柱子下端的旋塞不太容易控制流速的話,可以在下面接一個輸液器,就是打點滴那種,很便宜,一看你就知道怎麼用。可以手動上樣,如果懶或者柱子高,可以加個泵,將樣品通過泵打到柱子上端。夠詳細吧。
② 什麼是離子交換樹脂的濕視體積,我們測量的濕視體積指的是裝了柱經過壓實的還是未經壓實的
應該是指在食鹽水浸泡下,未經壓實的樹脂。
③ Deae52陰離子交換柱上樣量怎麼確定,想盡可能上很多樣品,但是不會影響分離效果
陰離子交換器 又叫陰床,作用是用陰樹脂中的氫氧根交換掉水中的其他陰離版子。離子交換器分為權:鈉離子交換器、陰陽床、混合床等種類,。離子交換柱(器)外殼一般採用硬聚氯乙烯(PVC)、硬聚氯乙烯復合玻璃鋼(PVC-FRP)、有機玻璃(PMMA)、有機玻璃復合透明玻璃鋼(PMMA-FRP)、鋼襯膠(JR)、不銹鋼襯膠等材質。主要用於鍋爐、熱電站、化工、輕工、紡織、醫葯、生物、電子、原子能及純水處理的前道處理,工業生產所需進行硬水軟化、去離子水制備的場合,還可用於食品葯物的脫色提純,貴重金屬、化工原料的回收,電鍍廢水的處理等。 有機玻璃離子交換裝置耐腐蝕、無色透明、適用於食品、醫葯、製糖及電子工業小規模純水制備。碳鋼襯膠離子交換裝置具有制水量大、強度高、成本低等特點,適用於大型鍋爐軟化水及大規模純水制備。
④ 蛋白純化離子交換柱一般多大體積
如果蛋白來質等電點是6.2,用DEAE柱子,應自選用8.0左右的pH值上柱子DEAE是陰離子交換柱,當環境pH高於蛋白質等電點的時候,蛋白質可以結合上陰離子柱。考慮到要穩定的結合一般選擇的環境pH要高於等電點值1.5左右。同時考慮維持蛋白質的穩定,環境pH一般選擇偏中性的值。
⑤ GE GST柱子用後處理
在位清洗:
1, 用2-3倍柱體積的,高端pH值為(0.1M Tris-HCl,0.5M NaCl,pH8.0)和低端pH值為(0.1M醋酸鈉,0.5M NaCl,pH4.5)的緩沖液交替沖洗柱子。
2, 重復循環3次。
3, 立即用3-5個柱體積的結合緩沖液(如PBS)再平衡柱子。
沉澱蛋白質的去除:
1, 用2倍柱體積的6M的鹽酸胍沖洗柱子。
2, 立即用5倍柱體積的結合緩沖液沖洗柱子。
通過疏水性互相作用結合到柱子上的物質的去除:
1, 用3~4倍柱體積的70%的乙醇沖洗柱子(或者2倍柱體積的非離子型去污劑如1%的曲拉通-100沖洗柱子)。
2,立即用5倍柱體積的結合緩沖液沖洗柱子。
⑥ dowex-sowx8-200強陽離子交換樹脂裝柱時的體積怎麼算
柱高的75%一80%
⑦ 離子交換樹脂 體積全交換容量 eq/l表示什麼意思
離子交換樹脂的離子交換容量
離子交換樹脂進行離子交換反應的性能,表現在它的「離子交換容量」,即每克干樹脂或每毫升濕樹脂所能交換的離子的毫克當量數,meq/g(干)或 meq/mL(濕);當離子為一價時,毫克當量數即是毫克分子數(對二價或多價離子,前者為後者乘離子價數)。它又有「總交換容量」、「工作交換容量」和 「再生交換容量」等三種表示方式。
1、總交換容量,表示每單位數量(重量或體積)樹脂能進行離子交換反應的化學基團的總量。
2、工作交換容量,表示樹脂在某一定條件下的離子交換能力,它與樹脂種類和總交換容量,以及具體工作條件如溶液的組成、流速、溫度等因素有關。
3、再生交換容量,表示在一定的再生劑量條件下所取得的再生樹脂的交換容量,表明樹脂中原有化學基團再生復原的程度。
通常,再生交換容量為總交換容量的50~90%(一般控制70~80%),而工作交換容量為再生交換容量的30~90%(對再生樹脂而言),後一比率亦稱為樹脂的利用率。
在實際使用中,離子交換樹脂的交換容量包括了吸附容量,但後者所佔的比例因樹脂結構不同而異。現仍未能分別進行計算,在具體設計中,需憑經驗數據進行修正,並在實際運行時復核之。
離子樹脂交換容量的測定一般以無機離子進行。這些離子尺寸較小,能自由擴散到樹脂體內,與它內部的全部交換基團起反應。而在實際應用時,溶液中常含有高分子有機物,它們的尺寸較大,難以進入樹脂的顯微孔中,因而實際的交換容量會低於用無機離子測出的數值。這種情況與樹脂的類型、孔的結構尺寸及所處理的物質有關。
⑧ 關於蛋白純化的GE填料柱
如果是常用的SK柱子,材質就是PP聚丙烯紅色外圈和PA聚醯胺(尼龍)。
⑨ 離子交換柱的性能
國外糖廠離子交換柱的有效容積(裝載樹脂量)一般為3~10m3,直徑2.3~3.3m,高3.3~4m,樹脂床的高度0.6~2m。樹脂柱為立式圓筒形結構,兩端密封,能承受一定的工作壓力。它通常用鋼板焊接製成,內壁整體襯上耐酸、鹼的橡膠層,小型樹脂柱可全用不銹鋼製造。 樹脂柱總高度約為樹脂層的兩倍,以備樹脂工作時體積膨脹和防止反洗時樹脂被沖走。如果樹脂的粒度較大,對通過液體的阻力較小,樹脂層可較高,並相應縮小柱體的直徑。但如樹脂粒度較細,對液體的阻力較大,則樹脂層不宜高,以免影響液體的通過,降低它的生產能力。有些裝載細顆粒樹脂的柱,樹脂層的高度只約0.8m,但它的工作周期時間亦較短。
⑩ 凝膠過濾層析上樣體積為什麼只有1-2ml,如果體積大了會有什麼影響
凝膠過濾層析上復樣體積為什制么只有1-2ml,如果體積大了會有什麼影響
你說的洗脫體積之差是指兩個組分的洗下來的體積?你這個問題第一次見,沒有聽說過樣品體積要小於洗脫體積之差這種說法,你在哪裡看到的.一般使用凝膠過濾層析,想要獲得高解析度,上樣體積控制在柱床體積的0.5—4%,最好是2%,群組分離時可以達到30%,小於0.5%沒有意義了.另外,目前市面上解析度最好的柱料是GE的Superdex,手填柱子的話可以達到10K解析度.預裝柱應該更高,但是十分昂貴,沒有試過.其他柱料分離的解析度要求兩種蛋白的分子量相差一倍以上,如果不滿足這個條件,大多是騙人的.還有柱料的選擇,緩沖液的選擇和樣品的處理等等很多條件都影響了凝膠層析的效果.