細胞培養基過濾裝置

『壹』 請問制備培養基時如何過濾除菌

1、滅菌方法
培養基的滅菌方法主要有兩種，高壓除菌及.22um微孔濾膜過濾除菌。與過濾相比，高壓滅菌的工作強度小，成本較低，但易造成營養成分的流失，而且在多次加樣（無菌谷氨醯胺溶液，無菌碳酸氫鈉溶液等）過程中容易造成二次污染。大多數培養基採用0.1～0.2μm孔徑的微孔濾膜進行過濾滅菌，並且已成為培養基除菌的發展方向，它可低限度地減少培養基的營養損失。
1.1 高壓滅菌

某些培養基（如MEM）可進行高壓滅菌，例如清大天一的MEM培養基中的MD605、MD609等。這類培養基一般不含有L-谷氨醯胺和碳酸氫鈉，一般是在培養基高壓滅菌後加入L-谷氨醯胺和碳酸氫鈉的無菌的液體。另外可高壓的谷氨酸鹽（如L-丙氨醯-L-谷氨醯胺）可代替L-谷氨醯胺。
可高壓滅菌的培養基在121℃、15psi，15分鍾的條件下完全可達到滅菌效果及營養成分的最小損失，不需將滅菌時間延長。為保證高壓滅菌的效果，滅菌設備的驗證很關鍵。
1.2 過濾滅菌
可供過濾滅菌使用的濾膜很多，其材料多為polyethersulphone（PES）、尼龍、多聚碳酸鹽、醋酸纖維素、硝酸纖維素、PTFE、陶瓷等。一般情況下採取正壓過濾，正壓過濾較之負壓過濾具有流速高、過濾快、不易污染，可避免蛋白質產生大量氣泡等優點。一般使用過濾器可參照各供應商的產品說明書。
目前大多數實驗室和制葯企業採用微孔濾膜濾器（如Zeiss濾器）或立式微孔濾器（Millipore、Pall）除菌。微孔濾膜濾器為不銹鋼，中間可夾放0.22um濾膜。使用這種濾器最重要步驟是安裝濾膜及無菌過濾過程。如在使用Zeiss濾器時，先要用培養用水將濾膜充分潤濕，在安裝濾膜時可在其上放置一層定性濾紙再固定。消毒時旋鈕不要扭太緊，凡與空氣接觸部位都要包好（可用牛皮紙、紗布、無紡布等）；高壓滅菌後，在無菌環境中立即將旋鈕扭緊。過濾除菌結束後，要打開濾器，檢查濾膜是否完整，如果濾膜破裂，需重新進行過濾除菌過程。立式微孔濾器可以選用不同的微孔濾柱體積，因為濾膜的折疊，膜面積顯著增大，液體處理量大，而且不容易發生堵塞現象。

『貳』 細胞培養濾器一次可濾多少培養基

單純培養基的話，大概300ml吧，我感覺，我們是加血清的培養基然後才濾的，所以不一樣，加20%血清的基本上120ml就得換

『叄』 細胞培養瓶密封蓋和過濾蓋的區別

Corning
和Costar
細胞培養瓶有多種規格和多種瓶蓋類型可提供,以滿足用戶的不同需求.由高質量的原生聚苯乙烯(PS)製作,表面經過TC處理,促進細胞的貼壁生長,生產批號可追蹤,100%通過完整性檢測,無熱原,均為無菌包裝.
密封蓋(Plug
seal
caps)：Corning經典瓶蓋類型.一次成形不帶內墊,常用於密閉培養,可保證其密閉性；旋松瓶蓋時也可用於開放培養.
聚酯蓋(Phenolic
style
caps)：常用於開放培養(需要旋松瓶蓋).只需輕輕旋松瓶蓋便可保證瓶內氣體與環境中氣體的交換.
透氣蓋(Vent
caps)：瓶蓋帶有0.2μm疏水濾膜,提供無菌氣體交換,減少污染的風險.常用於開放培養,推薦用於CO2培養箱培養,尤其適用於需要長期培養的實驗.
隔墊蓋(Septum
caps)：隔墊帶有預切割口,可承受多次穿插.可使用吸嘴(或者5ml以下規格的移液管)穿插隔墊進行加液、吸液或者收獲細胞,減少污染的機會,維持RoboFlask
培養瓶封閉無菌的環境
直頸(Straight
neck)：直頸的設計可減少培養基因晃動而流到瓶里.
斜頸(Canted
neck)：易於傾注,移液管或者細胞刮容易進入瓶體.是Corning公司經典的設計.
角度頸(Angled
caps)：移液管或者細胞刮易於進入瓶身,並且可減少培養基因晃動而流到瓶蓋.
三角形(Triangular
and
modified
triangular)：移液管或細胞刮更易達到瓶角,寬底增加穩定性.
矩形(Rectangular)：斜頸的矩形培養瓶瓶底至瓶頸是一個坡度設計,易於傾注,移液管或者細胞刮容易進入瓶體,大部分斜頸瓶都有一個裙邊以增加穩定性.直頸和角度頸的矩形培養瓶整個瓶底都是培養面,節省空間並減少培養基因晃動而流到瓶蓋.
RoboFlask
培養瓶(RoboFlask
vessels)：微孔板尺寸的培養瓶,兼容自動操作的培養系統,92.6cm2生長面積.

『肆』 細胞培養過濾培養基和PBS時所用的0.22的濾膜是水膜還是有機膜或者是混合膜

0.22um除菌濾膜有多種不同的材質，常用的有醋酸纖維素、聚醚碸、PVDF、聚四氟乙烯、尼龍等。若過濾水溶液的濾膜為疏水材質，濾膜表面一般有一層親水配體。過濾細胞培養基常用的濾膜材質為醋酸纖維素和聚醚碸。希望對你有幫助。GOOD LUCK :)

『伍』 細胞培養基用過濾器是304材質還是316材質

304和316都可以，大多企業的純化水管道都是304材質，國外進口過濾器一般為316材質。

『陸』 細胞培養液過濾器有哪些規格的

有40um 70um 和100um的 實驗室用的40um百千生物的 挺好的

『柒』 哪家公司的正壓過濾器好用呢，主要用於細胞培養基的過濾

用於過濾培養基之類的量小就用一次性膜式濾器。
量大的話一般都用是專不銹鋼的膜式濾器。
你網路一屬下不銹鋼濾器，或者打電話給儀器公司都會有的，進口的質量會好點，國產的其實也能用，哪個公司的都差不多，只是你用的時候注意流速壓力。