1. 為什麼流動相的配置有些試劑用色譜純,有些用分析純
試劑規格基本上按純度(雜質含量的多少)劃分,共有高純試劑、光譜純試劑、基準試劑、分光純試劑、優級純試劑、分析試劑和化學純試劑等7種。
試劑純:是指一般化學試驗用的,有較少的雜質,不妨礙實驗要求。
分析純:是指做分析測定用的試劑,雜質更少,不妨礙分析測定。
色譜純:色譜純試劑是在最高靈敏度下以10-10克下無雜質峰來表示的。是指進行色譜分析時使用的標准試劑,在色譜條件下只出現指定化合物的峰,不出現雜質峰。
2. 高效液相色譜的流動相要經過哪些處理
流動相要先過濾,超聲脫氣後方可使用。
另外選用試劑是要選用色譜級的專,過濾時選擇合屬適的濾膜。流動相最好現配現用,不要保存太長時間。
使用旋轉蒸發儀上的真空泵 抽空氣20min,可以達到脫氣的作用。使用濾膜過濾掉雜質。
流動相必須過濾膜,用前要超聲除氣泡半個小時左右,否則基線不穩
儀器和色譜柱先要用有機溶劑(如乙腈等)好好清洗一下,待基線平衡後才能進一步工作,乙腈和水混合的流動性最好先超聲抽濾脫氣,准備工作做好了會節省好多時間。
若用色譜純的乙腈和超純水做流動相,流動相可以不用過濾膜,但超純水需要超聲約30分鍾脫氣。
朋友可以到行業內專業的網站進行交流學習!
分析測試網路網這塊做得不錯,氣相、液相、質譜、光譜、葯物分析、化學分析、食品分析。這方面的專家比較多,基本上問題都能得到解答,有問題可去那提問,網址網路搜下就有。
3. 高效液相色譜法流動相為什麼要用過濾膜過濾
樓上正解。但不光是堵塞柱子,如果有不容顆粒在流動相中,也會對泵進行磨損。
4. 流動相乙腈要過濾嗎
一定要過濾.
5. 流動相在使用前為什麼要過濾和脫氣
過濾是為了除去流動相中的雜質,保護系統和柱子.脫氣是為了除去溶解在流動相中得氣泡,降低基線噪音.
6. 液相色譜儀的流動相為什麼要過濾
通常用0.4μm的濾膜過濾,這樣可以去除流動相中比較大的微粒,防止堵塞儀器和柱子。精密儀器維修很麻煩並且損傷壽命
7. 高效液相色譜法流動相在使用前需要過濾與脫氣,常用脫氣方法有 真空脫氣及在線脫氣。
液相色譜流動相脫氣使用較多的方法大概有四種:氦氣脫氣、真空脫氣、超聲波脫氣、加熱脫氣。
1.氦氣脫氣:氦氣脫氣是很有效的脫氣方法。氦氣緩緩的通過流動相趕去溶入的空氣,如果使用得當,在10min內可除去80%~90%的溶入氣體。由於氦氣在流動相中的溶解度極低,所以用氦氣脫氣保護的流動相可以認為是一個無氣體溶解體系。其缺點是氦氣價格比較昂貴,會增加檢驗成本。
2.真空脫氣:也是比較常用的脫氣方法。現在多數企業都最常用這種辦法,貯液器被抽成部分真空,溶入的氣體蒸發形成氣泡溢出,其效果僅次於氦氣脫氣。象Agileng1200液相色譜使用的是在線脫氣機。在線脫氣只適合脫完氣之後的流動相,在使用過程中的微量脫氣。
3.超聲波脫氣: 將配製好的流動相連容器放入超聲水槽中脫氣10-20min。這種方法比較簡便,又基本上能滿足日常分析操作的要求,所以,目前仍廣泛採用。這種方法只能除去30%的溶解氣體,有時還會引起氣體溶解度的增加。對氧敏感的檢測器不宜用此法。
4.加熱迴流脫氣:該方法雖然效果很好,但是適用范圍較窄。對於有機溶劑或混合流動相不適合用此法,因為揮發性組分會損失掉,改變流動相的組成。
綜合來說,用真空抽濾後,再用超聲脫氣還是最常用的辦法,用氦氣的方法是效果最好的辦法,而用在線脫氣呢,本身也是真空脫氣,但它可以放到儀器上使用,是一種保證性的辦法。
8. 為什麼高效液相色譜儀的流動相在使用前必須過濾,脫氣
用於高效液相色譜的流動相必須事先除氣,否則容易在系統中逸出氣泡,影響泵的工作。氣泡還會影響色譜柱的分離效率、檢測器的靈敏度、基線的穩定性,甚至使其無法檢測。
噪音增加,基線不穩定,突然跳躍。此外,溶解在流動相中的氧可以與樣品、流動相甚至固定相(如烷基胺)發生反應。溶解氣體也會引起溶劑ph值的變化,從而導致分離或分析結果的誤差。
常用的除氣方法有加熱沸騰、抽真空、超聲波、吹氦等。
高效液相色譜(hplc)是色譜的一個重要分支。以液體為流動相,高壓輸液系統,將不同極性的單溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入固定相色譜柱。分離柱中的組分後,用檢測器檢測。實現了樣品的分析。
(8)用色譜純的流動相需要過濾嗎擴展閱讀:
液相色譜-質譜聯用(LC-MS)可增加額外的分析能力,准確識別和量化細胞和組織裂解物、血液、血漿、尿液和口服液等復雜樣品基質中的微量化合物。
流動相和固定相都是液體。流動相與固定相應不相容(極性不同,避免固定液流失),界面清晰。當樣品進入色譜柱時,溶質分布在兩相之間。達到平衡後,遵循高效液相色譜的計算公式。
公式中cs溶質在固定相的濃度、cm溶質在流動相的濃度、vs固定相的體積和vm流動相的體積。llpc與gpc有相似之處,即分離順序取決於k值較大的組分的保留值,但也存在差異。在gpc中,流量對k的影響較小,而llpc流量對k的影響較大。
9. 液相色譜使用前為什麼要過濾和脫氣
一般抄流動相在上儀器前必須經過兩個襲步驟:減壓抽濾和超聲
減壓抽濾有兩個目的,
一個是過濾掉氣體,尤其是有機相和水相混合的時候,會產生大量的氣泡。這些氣泡進入儀器就會堵住儀器和色譜柱,所以要除掉。
一個是過濾掉不溶性微粒。你看一般的過濾膜是4.5um孔徑的,這個是針對你的色譜柱而定的。色譜柱一般是5um的粒徑,保證過濾的流動相裡面小的毛絮啊,顆粒啊都不會進入色譜柱。
超聲的主要目的也是為了脫氣,另外還有助溶和令溶液混合均勻等作用。不過超聲主要是為了去掉溶劑瓶瓶壁和瓶底的氣泡,所以沒必要超聲太久的時間,3-5min足夠了。
總而言之,都是為了保護儀器和色譜柱,防止氣泡和雜質進入。
10. 相要經過過濾,那標准品和待測樣品需不需要過濾
因為要過濾掉流動相和待測樣品裡面的不溶性物質和氣泡。防止它們堵住儀器。
很多東西不是你看著澄清就真的干凈。液相的管路很細,還有色譜柱的孔徑也很小,萬一堵住了就報廢了。所以一定要過濾。
流動相不單要過濾掉不溶物,還有就是氣泡。這些氣泡可能會堵住泵頭,堵住色譜柱,就算哪兒都不會堵上也會導致流速不準確,柱壓不穩定,基線波動等等。所以一定要過濾。
你的色譜柱是5um粒徑的,用4.5um孔徑濾膜就可以了。如果色譜柱粒徑更小,那麼也應該選擇孔徑更小的濾膜。
另外,如果你的流動相和待測樣品是純的色譜純有機相,其實就沒必要過濾了。