層析柱頭與膠面要分開一段距離離子交換填料

A. 我要分離純化一種未知酶，一切未知，想用凝膠層析和離子交換層析分離，不知選用什麼填料合適有好的建議

建議用離子交換層析。凝膠過濾層析流速慢，上樣量低，而且分離效果一般，凝膠回過濾答一般用於層析的後期包括除鹽，去除降解片段之類的。
離子交換一般就用到DEAE，因為大部分蛋白都偏酸。要是你的酶是鹼性蛋白，那就更好辦，上個CM柱，其他雜蛋白就留不下多少了。
所以先拿DEAE試試吧。

B. 怎樣利用離子交換柱層析法分離不同蛋白質

因為蛋白質具有等電點，利用帶電性質進行分離

C. 請教離子交換層析與親和層析方面的問題

親和層析是通過層析介質表面鍵合的配基與目標物質特異性吸附，然後非目標物流穿，再改變流動相是目標物質的特異性吸附消失，從而達到純化目的。凝膠層析是通過層析介質孔徑的設定，使分子量大小相差比較大的物質通過的路徑不一樣，從而達到分離效果。離子交換是通過層析介質表面的帶電荷的基團與目標之間產生吸附，通過改變鹽濃度使吸附力的大小改變，從而使不同的物質解吸的速度不一樣，達到分離的效果。離子交換又分陰離子交換和陽離子交換。一般來說以上三種，離子交換應用面最廣，親和特異性最好，體積排阻的話只能對分子量差距很明顯的物質進行分離。

D. 柱層析，上樣之後，是不是先讓樣品往下流，等它的液面下降到接近填料的位置，再加入洗脫液

你好！

等到樣品全部進入填料再加洗脫液。

E. 凝膠過濾層析和離子交換層析分離蛋白質的原理有何不同

所有的層析在原理上都是相通的,區別在於流動相和層析劑之間的作用力的回不同.
離子交換是利用答蛋白質表面的電荷與層析劑上的離子基團的靜電作用.
凝膠過濾層析利用了凝膠的多孔性,根據溶劑分子的大小進行分離.

F. 離子交換和凝膠層析裝柱時，出現氣泡，結節怎麼處理

吸附分離效果不好來，考慮濕法裝柱源

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G. 離子交換和凝膠層析裝柱時,出現氣泡,結節怎麼處理

可以用適量的有機溶劑潤洗一下層析柱，柱子體積較小的話就用玻璃棒攪勻排除一內下氣泡。

不管是干柱和容濕柱，都要加層析液，不能要求一開始就沒有氣泡的。要用洗脫劑不停的洗脫，就是用配置好的試劑一邊一邊對柱子進行洗脫，這樣不但可以消除氣泡，還可以使硅膠充分沉降，讓層析效果更好。等柱子沒有氣泡後在上樣用洗脫液進行層析。

若柱中留有氣泡或各部分松緊不勻（更不能有斷層）時，會影響滲透速度和顯色的均勻。去除就是用玻璃棒攪拌，趕走氣泡。

(7)層析柱頭與膠面要分開一段距離離子交換填料擴展閱讀：

水溶液中的一些陽離子進入反離子層，而原來在反離子層中的陽離子進入水溶液，這種發生在反離子層與正常濃度處水溶液之間的同性離子交換被稱為離子交換作用。

離子交換主要發生在擴散層與正常水溶液之間，由於黏土顆粒表面通常帶的是負電荷，故離子交換以陽離子交換為主，故又稱為陽離子交換。離子交換嚴格服從當量定律，即進入反離子層的陽離子與被置換出反離子層的陽離子的當量相等。

H. 離子交換柱層析法分離氨基酸實驗的結論是

氨基酸有不同的等電點

I. 既有分子排阻作用，又有離子交換功能的填料

色譜分析法基本原理
色譜法，又稱層析法。根據其分離原理，有吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜與排阻色譜等方法。

J. 做酶的分離純化是做離子交換和凝膠層析時使用普通的玻璃層析柱，只選擇填料行不行

沒問題的。
普通的玻璃層析柱只是做離子交換、凝膠層析壓力沒問題，一般也用不到什麼有機溶劑，所以放心用吧。