『壹』 高效液相為什麼不出峰，與流動相有關嗎
如果你用紫外檢測器的話，需要調節紫外檢測器的波長。
這個與你換什麼溶劑定容是沒有關系的。
還有一種可能是，你選擇色譜柱不合適，對生物鹼的吸附太強，導致樣品滯留在色譜柱中，所以不會出峰了。
先排除儀器和柱子的問題，按柱子出廠說明書上的條件走一針甲苯溶液（100ppm左右），看看峰形和理論塔板數，如果一切正常，那就是說明樣品出了問題，可能是分解了。
你做的是什麼樣品，柱子合適不？不同的柱子會有不同的效果，和波長肯定有關系了。如果不確定合適的波長可以放到紫外下掃描一下最大吸收峰
也就是說，之前的人有作出結果來,而你現在不行了？那就走甲醇，0.1流速走通宵，不敢走通宵的話就走一整天，然後再看看結果，實在不行聯系工程師
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『貳』 為什麼高效液相色譜要用甲醇和水做洗脫劑
因為水的極性最高，甲醇也是強極性的，如果你是做反相色譜（流動相極性強於固定相）通常就是用甲醇和水做流動相，如果是正相色譜可以使用極性較低的溶劑，如乙酸乙酯、苯之類的，一般來講液相色譜法大多數是反相色譜，所以使用甲醇水做流動相很常見，流動相可以100%的甲醇，但是沒辦法100%的水，因為純水做流動相壓力過大，儀器承受不住。
『叄』 高效液相色譜儀是以什麼為流動相
甲醇或乙腈和水按比例混合，也有用純甲醇、純乙腈、純水這樣的單一成分的流動相，當然有些還會加一些微量的緩沖劑。
對應不同的色譜柱，用不同的流動相。
『肆』 純水是否能通過高效液相色譜柱
看是什麼柱子，有一些做糖的柱子就是要求純水做流動相的。但一般的C8或C18柱子不行，要求最少5%有機相，以防對色譜柱傷害
『伍』 液相色譜裡面能只用水做流動相嗎
這個得看你的色譜柱。
一般的反相色譜柱不耐純水。如果用的話會特別費。專
我當初做過屬一個實驗，流動相是0.025mol/L的KH2PO4，色譜柱是C18柱，大概半個月換一根吧。
特殊的色譜柱可以耐受純水，但是可能分離效果不好，峰型也不一定好。
另外，純水很 容 易 長微生物。一般純凈水開瓶之後在25℃放置1天，過濾的速度就會緩慢，放三天就渾濁了。如果你的流動相是純水，那麼系統、色譜柱很容易堵塞。所以不建議使用。
『陸』 高效液相色譜的流動相要經過哪些處理
流動相要先過濾，超聲脫氣後方可使用。
另外選用試劑是要選用色譜級的專，過濾時選擇合屬適的濾膜。流動相最好現配現用，不要保存太長時間。
使用旋轉蒸發儀上的真空泵 抽空氣20min，可以達到脫氣的作用。使用濾膜過濾掉雜質。
流動相必須過濾膜，用前要超聲除氣泡半個小時左右，否則基線不穩
儀器和色譜柱先要用有機溶劑（如乙腈等）好好清洗一下，待基線平衡後才能進一步工作，乙腈和水混合的流動性最好先超聲抽濾脫氣，准備工作做好了會節省好多時間。
若用色譜純的乙腈和超純水做流動相，流動相可以不用過濾膜，但超純水需要超聲約30分鍾脫氣。
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