大孔樹脂與硅膠柱層析出料順序

① 大孔吸附樹脂用於白頭翁皂苷的分離時洗脫次序有何規律

大孔吸附樹脂用於白頭翁皂苷的分離時洗脫次序規律為：分離、純化、除雜、濃縮。

以酒精為例，酒精溶劑浸提得到較粗的白頭翁總皂苷，脫脂後，經大孔樹脂層析得到高產，高純的白頭翁總皂苷，得率為9.4%。總皂苷經硅膠柱層析得到無色的,純度較高的單體皂苷,得率為22.8%。

通過薄層層析把純化的單體皂苷與標准品白頭翁皂苷Ⅲ進行對照，分離純化的單體皂苷與標准品相同，是3-O-[α-L-鼠李糖基(1→2)-α-L-阿拉伯糖苷]-3β，23-羥基-△20(29)-羽扇豆烯-28-O-[α-L-鼠李糖基(1→4)-β-D-葡萄糖基(1→6)]-β-D-葡萄糖酯苷。

大孔吸附樹脂吸附機理

大孔吸附樹脂的吸附實質為一種物體高度分散或表面分子受作用力不均等而產生的表面吸附現象，這種吸附性能是由於范德華引力或生成氫鍵的結果。同時由於大孔吸附樹脂的多孔結構使其對分子大小不同的物質具有篩選作用。

通過這種吸附和篩選原理，有機化合物根據吸附力的不同及分子量的大小，在大孔吸附樹脂上經一定溶劑洗脫而達到分離、純化、除雜、濃縮等不同目的。

非極性物質在極性介質+(水)+內被非極性吸附劑吸附，極性物質在非極性介質中被極性吸附劑吸附，帶強極性基團的吸附劑在非極性溶劑里能很好的吸附極性化合物。

聚苯乙烯樹脂一般適用於非極性和弱極性物質的化合物，如皂苷類和黃酮類；聚丙烯酸類樹脂，一般帶有酯基或醯氨基，對中極性和極性化合物如黃酮醇和酚類的吸附較好。

參考資料來源：網路-大孔吸附樹脂

② 離子交換層析中流出物質順序是什麼

若用離子交換層析分離物質，以蛋白質為例，離子交換層析中，基質是由帶有電荷的樹脂或纖維素組成。帶有正電荷的稱之陰離子交換樹脂；而帶有負電荷的稱之陽離子樹脂。離子交換層析同樣可以用於蛋白質的分離純化。

由於蛋白質也有等電點，當蛋白質處於不同的pH條件下，其帶電狀況也不同。陰離子交換基質結合帶有負電荷的蛋白質，所以這類蛋白質被留在柱子上，然後通過提高洗脫液中的鹽濃度等措施，將吸附在柱子上的蛋白質洗脫下來。結合較弱的蛋白質首先被洗脫下來。

反之陽離子交換基質結合帶有正電荷的蛋白質，結合的蛋白可以通過逐步增加洗脫液中的鹽濃度或是提高洗脫液的pH值洗脫下來。

(2)大孔樹脂與硅膠柱層析出料順序擴展閱讀：

對於離子交換纖維素要用流水洗去少量碎的不易沉澱的顆粒，以保證有較好的均勻度，對於已溶脹好的產品則不必經這一步驟。

溶脹的交換劑使用前要用稀酸或稀鹼處理，使之成為帶H+或OH-的交換劑型。陰離子交換劑常用「鹼-酸-鹼」處理，使最終轉為-OH-型或鹽型交換劑；對於陽離子交換劑則用「酸-鹼-酸」處理，使最終轉為-H-型交換劑。

梯度不要上升太快，要恰好使移動的區帶在快到柱末端時達到解吸狀態。目的物的過早解吸，會引起區帶擴散；而目的物的過晚解吸會使峰形過寬。

③ 聚醯胺、硅膠、大孔樹脂色譜柱適合分離的成分分別是什麼

聚醯胺與硅膠對極性大的有機物吸附強
大孔樹脂主要用於水溶性成分的分離純化，尤其是大分子的親水性成分如多糖、皂苷、黃酮、生物鹼、三萜類化合物

④ 硅膠柱層析的操作技術

• 硅膠柱層析的原理

  利用吸附原理，即利用硅膠對中葯混合物中各種成分吸附能力的差異，而使混合物中各成分得以分離的色譜方法。

• 硅膠柱層析的操作方法及注意事項 ：

1. 裝柱

   操作要點：裝柱前柱底要墊一層脫脂棉以防吸附劑外漏。 有干法裝柱和濕法裝柱兩種方法

   （1）干法裝柱：將硅膠通過漏斗裝入柱內，中間不應間斷，形成一細流慢慢加入管內。也可用橡皮槌輕輕敲打柱硅膠柱使硅膠裝填連續均勻、緊密。柱裝好後，打開下端活塞，然後倒入洗脫劑洗脫以排盡柱內空氣，並保持一定液面。

   （2）濕法裝柱：將最初准備使用的洗脫劑裝入柱內，打開下端活塞，使洗脫劑緩慢流出。然後把硅膠慢慢連續不斷地倒入柱內（或將硅膠與適量洗脫劑調成混懸液慢慢加入柱內，），硅膠依靠重力和洗脫劑的帶動，在柱內自由沉降，此間要不斷把流出的洗脫劑加回柱內保持一定的液面，直至把硅膠加完並在柱內沉降不再變動為止。然後在硅膠上面加一小片濾紙或少許脫脂棉。根據加樣量控制洗脫劑液面至一定高度。

   （3）勻漿法： 攪成勻漿。加入干硅膠體積一倍的溶劑用玻璃棒充分攪拌。如果洗脫劑是石油醚/乙酸乙酯/丙酮體系，就用石油醚拌；如果洗脫劑是氯仿/醇體系，就用氯仿拌。如果不能攪成勻漿，說明溶劑中含水量太大，尤其是乙酸乙酯/丙酮，如果不與水配伍走分配色譜的話，必須預先用無水硫酸鈉久置乾燥。氯仿用無水氯化鈣乾燥，以除去1%的醇。如果樣品對酸敏感，不能用氯仿體系過柱。

2. 上樣

   將欲分離的樣品溶於少量裝柱時用的洗脫劑中，製成體積小、濃度高的樣品溶液，加入層析柱中硅膠面上。如樣品不溶於裝柱時用的洗脫劑，則將樣品溶於易揮發的溶劑中，並加入適量硅膠（不超過柱中硅膠全量的1/10）與其拌勻，除盡溶劑，將拌有樣品的硅膠均勻加到柱頂（始終保持洗脫劑有一定的液面），再覆蓋一層硅膠即可。

   上樣時注意沿著柱內壁慢慢加入，始終保持硅膠上端表面平整；上樣量為硅膠的1/60~1/30。

3. 洗脫

   洗脫劑的選用可通過薄層色譜篩選，一般TLC展開時Rf 值為0.2~0.3的溶劑系統是最佳的洗脫系統，採用梯度洗脫法洗脫。

   先打開柱下端活塞，保持洗脫劑流速1~2滴/秒。上端不斷添加洗脫劑（可用分液漏斗控制添加速度與下端流出速度相近）。如單一溶劑洗脫效果不好，可用混合溶劑洗（一般不超過三種溶劑），通常採用梯度洗脫。洗脫劑的洗脫能力由弱到強逐步遞增。

4. 收集處理

   等份收集洗脫液，每份收集量大概與所用硅膠的量相當。每份洗脫液採用薄層定性檢查，合並含相同成分的洗脫液。經濃縮、重結晶處理往往可得到某一單體成分。如仍為幾個單體成分的混合物，不易析出單體成分的結晶。則需要進一步層析或用其他方法分離。

   
   

5. 註：

   (1)柱色譜分離能力比薄層分離能力強，效果更好，尤其對結構相似、性質接近、採用薄層難以分離的成分分離效果好。

   (2) 洗柱子能不用含水的混合溶劑，就盡量不要用。

⑤ 大孔吸附樹脂與硅膠柱的原理的不同之處在什麼地方啊

大孔吸附來樹脂是一類不含自交換基團且有大孔結構的高分子吸附樹脂,具有良好的大孔網狀結構和較大的比表面積,可以通過物理吸附從水溶液中有選擇地吸附有機物即非極性或極性較弱的物質,具有物理化學穩定性高、比表面積大、吸附容量大、選擇性好、吸附速度快、解吸條件溫和、再生處理方便、使用周期長、宜於構成閉路循環、節省費用等諸多優點.樹脂吸附作用是依靠它和被吸附的分子(吸附質) 之間的范德華引力,通過它巨大的比表面進行物理吸附而工作,使有機化合物根據有吸附力及其分子量大小可以經一定溶劑洗脫分開而達到分離、純化、除雜、濃縮等不同目的.
硅膠柱的分離原理是根據物質在硅膠上的吸附力不同而得到分離,一般情況下極性較大的物質易被硅膠吸附,極性較弱的物質不易被硅膠吸附,整個層析過程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸過程.其中有微孔,對不同化合物的吸附能力不同,然後選用適當的洗脫劑進行洗脫從而達到分離.

⑥ 大孔吸附樹脂與硅膠柱的原理的不同之處在什麼地方

大孔樹脂吸附原理來：源 大孔吸附樹脂是以苯乙烯和丙酸酯為單體,加入乙烯苯為交聯劑,甲苯、二甲苯為致孔劑,它們相互交聯聚合形成了多孔骨架結構。樹脂一般為白色的球狀顆粒,粒度為20～60 目,是一類含離子交換集團的交聯聚合物,它的理化性質穩定

⑦ 蛋白質水解產物陽離子交換柱層析時的洗脫順序

pI 10.76的那個應該帶正電荷。陽離子交換柱本身帶負電荷。

⑧ 請問硅膠柱層析收集液的極性順序是怎樣的

1、干法裝柱嗎？硅膠被洗脫劑浸透後會出現透明的現象。
2、硅膠層析法的分離原理是根據物質在硅膠上的吸附力不同而得到分離，a與b的吸附力相差較大時，a會替代b被硅膠吸附，但不會是100％被替代。
3、一般情況下極性較大的物質易被硅膠吸附，極性較弱的物質不易被硅膠吸附。
4、整個層析過程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸過程。
5、若可以使用其它試劑，最好不用苯，苯的毒性相對較大。

⑨ 大孔吸附樹脂與硅膠柱的原理

大孔吸附樹脂是一類不含交換基團且有大孔結構的高分子吸附樹脂，具有良好的大孔網狀結內構和較大的容比表面積，可以通過物理吸附從水溶液中有選擇地吸附有機物即非極性或極性較弱的物質，具有物理化學穩定性高、比表面積大、吸附容量大、選擇性好、吸附速度快、解吸條件溫和、再生處理方便、使用周期長、宜於構成閉路循環、節省費用等諸多優點。樹脂吸附作用是依靠它和被吸附的分子(吸附質) 之間的范德華引力,通過它巨大的比表面進行物理吸附而工作,使有機化合物根據有吸附力及其分子量大小可以經一定溶劑洗脫分開而達到分離、純化、除雜、濃縮等不同目的。
硅膠柱的分離原理是根據物質在硅膠上的吸附力不同而得到分離， 一般情況下極性較大的物質易被硅膠吸附，極性較弱的物質不易被硅膠吸附，整個層析過程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸過程。其中有微孔，對不同化合物的吸附能力不同，然後選用適當的洗脫劑進行洗脫從而達到分離。

⑩ 硅膠、大孔吸附樹脂、反相硅膠柱層析、聚醯胺、SephadexL H-20、Sephadex G—100這些分離材料的分離原理

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