1. 凱傑公司生產的硅酮粉有哪些特點
硅酮塑料添加劑由超高分子量聚硅氧烷製成,外觀為白色顆粒或粉末。主要用作塑料加工助劑,克服了傳統的二甲基硅油加工上的麻煩和性能上的不足,硅酮添加劑使用安全、混合方便、性能穩定,在樹脂中容易分散,凱傑的硅酮粉硅氧烷的含量高,性能穩定,且具有以下功能和特點:
● 提高塑料加工流動性和脫模性。降低扭矩,減小設備磨損,充模容易,降低製品不良率;
● 明顯降低摩擦系數,提高滑爽性,改善表面光澤,增進表面絲質觸感,提高耐刮擦性能;
● 提高阻燃性,降低煙密度,提高阻燃材料(高填充)沖擊強度和表面光澤度;
● 具有良好的穩定性和非遷移性
2. qiagen 能提取多大的質粒
質粒提取操作步驟
——QIAGEN(德國凱傑)質粒提取試劑盒
一、細菌培養物的生長
1. 從瓊脂平板上挑取一個單菌落,接種到2-5mL含有適當抗生素的LB液體培養基中生長。將液體培養基置於37℃,300rpm的搖床中振盪8小時。
2. 用LB培養基以1/500~1/1000的比例稀釋含菌落的培養基。若為了獲得高拷貝質粒,用100-200ul含菌落液體培養基接種到100ml LB培養基中;若為了獲得低拷貝質粒,用250~500ul含菌落培養基接種到250ml LB培養基中。讓其在37℃,300rpm的搖床中振盪12-16小時。
二、細菌的收獲和裂解
1. 在6000×g,4℃條件下離心15min,收獲細菌。
2. 加入10ml Buffer P1重懸細菌。
3. 添加10ml Buffer P2,劇烈晃動離心管4-6次使其徹底混勻,室溫放置5min。
4. 加入10ml冰浴的Buffer P3到此溶菌產物中,晃動離心管4-6次使其混勻。
5. 將溶菌產物倒入針口密封的過濾器中,室溫放置10min,不要插入活塞。
6. 打開針口的密封蓋,輕輕擠壓活塞將溶菌產物過濾到一新的50ml離心管中。
7. 添加2.5ml Buffer ER到過濾的溶菌液中,充分混勻10次後冰上孵育30min。
三、質粒DNA的純化
1. 將QIAGEN-tip 500的柱子掛在另一離心管上,加入10ml Buffer QBT,讓管中溶液慢慢滴下排空。
2. 將第7步冰上孵育的溶菌液加入QIAGEN-tip柱子中讓其透過樹脂慢慢滴下。
3. 用2×30ml Buffer QC洗QIAGEN-tip柱。
4. 再用15ml Buffer QN洗脫DNA,用離心管收集DNA洗脫液。
5. 加入10.5ml異丙醇到洗脫液中使DNA沉澱下來,混勻。15000×g,4℃離心30min,離心後小心倒出上清液。
6. 洗DNA用5ml無內毒素-70%乙醇(添加40ml 96%-100%乙醇到試劑盒的無內毒素水中),15000×g,4℃離心10min。小心倒出上清液不要碰到質粒。
7. 烘乾離心管底部的質粒5-10min。用500ul無內毒素的Buffer TE重新溶解DNA。
3. qiagen endofree plasmid maxi kit試劑盒 價格多少
內毒素,即脂多糖或LPS,是革蘭氏陰性菌(如大腸桿菌)細胞膜的組成部分。細菌外膜的外層脂質部分是完全由內毒素分子所構成的。單個大腸桿菌細胞約包含兩百萬個LPS分子,每個LPS分子由疏水的脂質A(lipid A)部分、復雜的糖類殘基陣列部分及負電性的磷酸基團所組成。因此,每個內毒素分子都具有疏水域、親水域和電荷域,這使它在與其他分子相互作用時具有其獨特的自身性質。細菌在其活性生長期向其周圍微環境中散布少量的內毒素,在死亡時則釋放大量內毒素。
在質粒制備的細菌細胞裂解過程中,內毒素分子被從外膜釋放到溶菌液中。
去除內毒素
獲得專利的EndoFree Plasmid制備方法在標准IAGEN Plasmid純化方案中整合了對內毒素的去除步驟。使用QIAfilter Cartridge過濾中性的細菌裂解液,並加入專門的不含內毒素緩沖液(緩沖液ER)在冰上進行共同孵育。不含內毒素緩沖液能夠避免LPS分子與QIAGEN-tip中的樹脂結合,從而使每微克質粒DNA中含有的內毒素少於0.1EU。